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图解ELISA试剂盒的结果处理方法

作者:天驰生物 日期:2014-12-22 15:53:50 信息来源:http://www.tianchibio.com/

  1. ELISA实验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度标准品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。

  2. 平均OD值减去空白孔的OD值。

  3. 制作标准曲线。

  以减去本底后的OD值为X轴,标准品的浓度为Y轴,利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图,比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法(比如直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中选择一条最合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合,可以将标准品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,计算出标准品的浓度,得到的结果应该与实际浓度很接近(+/-10%)。选择拟合度最高的那条曲线。

  以下是CurveExpert1.4的使用过程:

  ① 将OD值和标准品浓度数据复制粘贴到表格中

图解ELISA试剂盒的结果处理方法

  ② 生成和选择标准曲线

图解ELISA试剂盒的结果处理方法

图解ELISA试剂盒的结果处理方法


  ③ 通过曲线计算样品浓度

图解ELISA试剂盒的结果处理方法

图解ELISA试剂盒的结果处理方法


  输入OD值,点击“计算”按钮,得到样品的准确浓度。

  或者得到相关方程,通过excel来计算浓度。

图解ELISA试剂盒的结果处理方法

图解ELISA试剂盒的结果处理方法


  如果需要导出方程,可点击“复制”,粘贴至excel中。

  ④ 对于OD值落在标准曲线之外的情况

  如果样品的OD值超过标准曲线的最高值,在实验前应该先将样品稀释从而得到准确的浓度。样品的最终度应该是计算出的浓度乘以稀释倍数。

 

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